活性氧(Reactive oxygen species, ROS)包括超氧自由基、過氧化氫、及其下游產(chǎn)物過氧化物和羥化物等，參與細(xì)胞生長增殖、發(fā)育分化、衰老和周亡以及許多生理和病理過程。DHE活性氧檢測(cè)試劑盒是一種利用熒光探針DHE(Dihydroethidium)進(jìn)行活性氧檢測(cè)的，DHE可自由透過活細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，并被細(xì)胞內(nèi)的ROS氧化，形成氧化乙啶;氧化乙啶可摻入染色體DNA中，產(chǎn)生紅色熒光。

在激發(fā)波長535nm,發(fā)射波長610 nm附近，使用熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡、熒光分光光度計(jì)、熒光酶標(biāo)儀、流式細(xì)胞儀等檢測(cè)熒光，從而測(cè)定細(xì)胞內(nèi)活性氧水平。

DHE探針標(biāo)記:

1、DHE溶液可在新鮮培養(yǎng)液、緩沖鹽溶液或組織灌流液中稀釋到所需濃度，100-1000倍稀釋， 以此染色液更換細(xì)胞培養(yǎng)液或灌流液;也可直接向細(xì)胞孵育液體或灌流液中加入DHE探針溶液至所需濃度。

2、依據(jù)細(xì)胞ROS含里的不同，DHE終濃度可選擇在100-1000倍稀釋的范圍，孵育

時(shí)間可選擇10-90分鐘，在37C或室溫進(jìn)行避光孵育。

3、孵育結(jié)束后用新鮮溶液清洗細(xì)胞或組織.