上海過表達真核質粒構建

上海過表達真核質粒構建

實驗技術簡介：慢病毒（ Lentivirus ）載體是以 HIV-1 （人類免疫缺陷1型病毒）為基礎發展起來的基因治療載體, 屬于逆轉錄病毒科，為RNA病毒。區別于一般的逆轉錄病毒載體，它對分裂細胞和非分裂細胞均具有感染能力。該載體可以將外源基因有效地整合到宿主染色體 上，從而達到持久性表達。目前慢病毒也被廣泛地應用于表達 RNAi 的研究中。由于體外合成 siRNA 對基因表達的抑制作用通常是短暫的，因而使其應用受到較大的限制。基于慢病毒載體設計的shRNA , 轉移到細胞內轉錄 siRNA 的策略，不但使有效轉染的細胞種類增加，而且長期穩定抑制目的基因在細胞中表達。在感染能力方面可有效地感染神經元細胞、肝細胞、心肌細胞、腫瘤細胞、內 皮細胞、干細胞等多種類型細胞，從而達到良好的基因治療效果，在美國已經開展了臨床研究，效果非常理想，因此具有廣闊的應用前景。

miRNA質粒表達載體是將含發卡結構的miRNA構建在含特殊啟動子的質粒表達載體，該載體轉入細胞后可利用細胞內的miRNA加工成熟機制獲得成熟的miRNA并發揮作用。
上海過表達真核質粒構建

1 、服務流程：
a) 提供您所需要構建miRNA名稱，miRbase登錄號或者序列，由我公司專業技術人員進行實驗設計并給出報價；
b) 簽訂miRNA質粒載體構建合成合同，支付預付款；
c) 設計合成引物， PCR反應擴增及PCR產物酶切；
d) 將酶切產物純化，克隆至miRNA表達質粒載體系統；
e) 后通過DNA測序，確認插入片段的準確性；
f)  miRNA表達載體合成結束，發貨并向客戶提供實驗報告。

2 、提供結果
a)質粒；
b) 測序圖譜/序列；
c) miRNA載體構建報告書。