高脂飲食誘導(dǎo)兔動脈粥樣硬化模型的建立方法及研究進展

一、模型建立的原理與動物選擇

兔是研究動脈粥樣硬化（AS）的經(jīng)典動物模型，因其脂代謝特點與人類相似：

1. 脂蛋白代謝：兔缺乏肝脂酶，LDL受體表達較弱，對膽固醇清除能力低，高脂飲食后易形成高膽固醇血癥。

2. 病理相似性：高脂飲食誘導(dǎo)的AS病變以脂質(zhì)沉積為主，可累及主動脈、冠狀動脈及腦基底動脈，部分方法可形成類似人類成熟斑塊。

3. 操作優(yōu)勢：兔體型適中，便于采血、影像學(xué)觀察（如MRI）及血管介入操作。

二、核心造模方法及步驟

1. 單純高脂飼料喂養(yǎng)法

• 飼料配方：

• 基礎(chǔ)配方：1-1.5%膽固醇 + 5-8%豬油/花生油 + 0.5%膽酸鈉 + 0.1%丙硫氧嘧啶 + 基礎(chǔ)飼料。

• 改良配方：添加蛋黃粉（7.5%）或維生素D3（加速鈣化）。

• 喂養(yǎng)周期：通常需8-12周，部分研究顯示4周可形成早期斑塊。

• 特點：

• 優(yōu)點：操作簡單，符合人類飲食特點，病變以脂質(zhì)浸潤為主。

• 缺點：成模時間長（易因感染死亡），斑塊多呈黃瘤樣，缺乏復(fù)雜斑塊特征（如纖維帽、壞死核心）。

2. 聯(lián)合損傷法（高脂飲食+血管/免疫損傷）

• 球囊拉傷法：

• 步驟：高脂喂養(yǎng)3周后，通過導(dǎo)管對頸動脈或腹主動脈進行球囊擴張，造成內(nèi)皮損傷。

• 效果：著加速斑塊形成（縮短至4-6周），斑塊分布明確，適用于局部病變研究。

• 免疫損傷法：

• 方法：高脂喂養(yǎng)期間注射小牛血清白蛋白（BSA）或卵清蛋白，誘發(fā)全身性炎癥反應(yīng)。

• 機制：免疫復(fù)合物沉積加重血管內(nèi)皮損傷，模擬AS的炎性反應(yīng)特征。

• 優(yōu)勢：形成成熟斑塊（含纖維帽、壞死核心），更接近人類晚期AS病理特征。

3. 特殊改良方法

• 高脂+維生素D3注射：

• 腹腔注射維生素D3（劑量未明確），4周后主動脈出現(xiàn)鈣化斑塊，血清Ca2?顯著升高。

• 高脂+脂多糖（LPS）誘導(dǎo)：

• 靜脈注射LPS（100-2000 ng/kg）聯(lián)合高脂飲食，通過炎癥反應(yīng)加速斑塊形成。

三、模型評價指標

1. 生化指標：

• 血脂水平：總膽固醇（TC）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）顯著升高（可達正常值的5-10倍）。

• 氧化應(yīng)激標志物：丙二醛（MDA）升高，超氧化物歧化酶（SOD）活性下降。

• 炎癥因子：C反應(yīng)蛋白（CRP）、白細胞介素-6（IL-6）水平升高。

2. 病理學(xué)觀察：

• 肉眼觀察：主動脈內(nèi)壁黃白色脂紋或斑塊。

• 組織學(xué)特征：

• 早期：內(nèi)膜泡沫細胞聚集（蘇木精-伊紅染色顯示多層泡沫細胞）。

• 晚期：纖維帽形成、平滑肌細胞增生、鈣化及壞死核心（油紅O染色顯示脂質(zhì)沉積）。

3. 影像學(xué)評估：

• MRI：可動態(tài)觀察血管壁增厚、斑塊體積及管腔狹窄程度。

• 超聲：檢測頸動脈內(nèi)中膜厚度（IMT）及血流動力學(xué)變化。

高脂飲食誘導(dǎo)兔動脈粥樣硬化模型模型優(yōu)缺點分析

五、應(yīng)用場景與研究方向

1. 基礎(chǔ)機制研究：

• 通過ApoE-/-兔模型（基因編輯）研究脂代謝異常與AS的關(guān)系。

• 利用免疫損傷法探索炎性因子（如NF-κB、IL-6）在斑塊破裂中的作用。

2. 藥物開發(fā)：

• 抗炎藥物（如IL-1β抑制劑）在聯(lián)合模型中的療效驗證。

• 基因療法（如AAV載體遞送LDLR基因）的可行性測試。

3. 影像技術(shù)優(yōu)化：

• 基于MRI的斑塊成分分析（纖維帽厚度、脂質(zhì)核心占比）。