構(gòu)建基于熒光多重cPCR的小鼠基因拷貝數(shù)檢測(cè)方法

構(gòu)建基于熒光多重cPCR的小鼠基因拷貝數(shù)檢測(cè)方法

目的：建立基于競(jìng)爭(zhēng)性聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(competitive polymerase chain reaction, cPCR)小鼠基因拷貝數(shù)變異(copy number variations, CNVs)的檢測(cè)方法,用于檢測(cè)野生小家鼠來源一號(hào)染色體替換系群體(population of specific chromosome 1 substitution strains, PCSSs)的CNVs。

方法：選取小鼠一號(hào)染色體上11個(gè)CNVs位點(diǎn),及7、9和X染色體上各1個(gè)內(nèi)對(duì)照位點(diǎn),分別構(gòu)建克隆質(zhì)粒為競(jìng)爭(zhēng)性粒模板,應(yīng)用cPCR技術(shù),建立熒光通用引物多重cPCR檢測(cè)方法。

結(jié)果：多重cPCR方案適用于小鼠一號(hào)染色體上11個(gè)CNV位點(diǎn)的拷貝數(shù)檢測(cè),且能準(zhǔn)確檢測(cè)X染色體的拷貝數(shù)。

結(jié)論：實(shí)現(xiàn)小鼠快速、高通量的CNVs檢測(cè),可準(zhǔn)確檢測(cè)小鼠1號(hào)染色體中11個(gè)CNV位點(diǎn)的拷貝數(shù)變異。